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>麥氏比濁管估計懸液中細菌濃度的方法介紹
技術文章
麥氏比濁管估計懸液中細菌濃度的方法介紹
在我們日常的微生物檢測工作和進行的某些實驗中,經常會遇到需要預估細菌懸液的細菌濃度問題,有時候我們需要精確計數細菌菌液濃度,會用到血球計數板來進行計數;但有時我們只需要一個比較粗略的估計值即可,這里小編推薦大家使用麥氏比濁法。
麥氏比濁管
是McFarland發明的一種用于微生物比濁的不同濁度的標準濁度管。具體的配制方法是根據硫酸和氯化鋇的比例來定的,有表可查,這樣不同比例生成的硫酸鋇沉淀的濃度不同,且都有定值。
麥氏比濁管估計懸液中的細菌濃度具體操作方法:
1、輕搖標準試管。
2、無菌操作將被測定的肉湯培養物加到與標準管相同直徑(大?。┑臒o菌試管中。
3、以無菌操作向被測定試管加入無菌生理鹽水(NaCl),直到濃度與所要求的標準管的濃度相同。
4、直接用眼睛看(需要經驗,誤差較大)。
5、找張白紙,打上平行直線,然后觀察讀數(如圖示,利用光在不同濃度液體折射不同)。
注意事項:
1、如果測定的肉湯培養物不澄清,由培養物的值減去未接種培養基的值來校正細菌濃度。
2、如果肉湯顏色很深,把未接種試管放在標準管的后面讀數即可。
3、測定好的細菌,最好做一下梯度稀釋涂布計數。
4、此種方法測定的準確性不是很高,如果是對細菌數量要求較精確的,請用紫外分光光度計。
5、麥氏比濁液應放室溫暗處保存,用前混勻,有效期為6個月。應用時為了準確也可以使用比濁儀但一定要防止麥氏濁度標準管未搖勻或已過期失效。
在微生物學檢驗中,麥氏比濁法常作為細菌鑒定、實驗配制菌液時大致判斷細菌菌液濃度的一種方法,通常認為,如將配細菌菌液濃度配成0.5麥氏比濁管時,相當于1.0×108細菌數/ml,由于方法本身就是一種估計的方法,所以盡管不同細菌大小差異很大,但除了真菌孢子,細菌的差別不大,結果不會有影響。
更新更新時間:2022-12-21
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